大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 (ELISA)試劑盒
簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品名稱:大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 (ELISA)試劑盒主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T產(chǎn)品形狀:盒裝液體保存條件:2-8℃有效期:6個(gè)月檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)波長(zhǎng):450nm研究領(lǐng)域:神經(jīng)生物學(xué),新陳代謝,免疫學(xué),其它研究運(yùn)輸:快遞送貨上門,運(yùn)輸保存條件苛刻產(chǎn)品可單獨(dú)送貨上門
- 產(chǎn)品型號(hào):MLXK3028
- 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間:2023-02-21
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大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 (ELISA)試劑盒 |
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。
用途
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
如何操作
雙抗體夾心法
1. 包被:用 0.05MPH 稀釋抗體至 1-10 μg/ml 的蛋白質(zhì)含量。 9. Oxycarbonate 包被緩沖液。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加入 0.1 ml,在 4°C 下過夜。次日,棄孔中的溶液,用洗滌緩沖液洗滌3次,每次3分鐘。 (簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2、加樣:將0.1ml稀釋的待測(cè)樣品加入上述包被的反應(yīng)孔中,37℃孵育1小時(shí)。然后洗。 (同時(shí)制作空白孔、陰性對(duì)照孔和陽性對(duì)照孔)。
3. 加入酶標(biāo)抗體:每反應(yīng)孔加入0.1ml新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(滴定后稀釋)。在 37°C 下孵育 0.5 至 1 小時(shí)并洗滌。
4加入底物顯色液:在每個(gè)反應(yīng)孔中加入0.1ml臨時(shí)配制的TMB底物溶液,37℃孵育10-30分鐘。
5. 反應(yīng)終止:向每個(gè)反應(yīng)孔中加入 0.05ml 2M 硫酸。
6、結(jié)果判斷:在白色背景下,可以用肉眼直接觀察結(jié)果:反應(yīng)孔顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)無色或極淺。 “-"符號(hào)表示。 OD值也可以測(cè)量:在ELISA檢測(cè)器上,在450nm(ABTS用于顯色時(shí)為410nm),用空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)量各孔的OD值,如果大于OD值的2.1倍的陰性對(duì)照,即陽性。
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